4.4 Replicación
in vitro del ADN (PCR)
El propósito del PCR es hacer muchas
copias de un fragmento de DNA.
Se realiza la amplificación de un
segmento específico de DNA, teniendo poco material disponible.
La reaccion en cadena polimerasa fue diseñada por el Dr. Kary Mullis en 1987.
Ganó el premio Nóbel
de Química en 1993 por su invento.
Utilizo el PCR para amplificación del gen
de b-hemoglobina
humana, y el diagnostico prenatal de anemia falciforme.
- A partir de una muestra pequeña de ADN se puede obtener una cantidad considerable para el estudio que se vaya a realizar.
- El producto se puede utilizar para clonar, secuenciar y análisis.
- Se puede amplificar ADN de cualquier organismo vivo o muerto.
- Sus aplicaciones son múltiples: medicina forense, diagnósticos, análisis prenatales, etc.
Materiales para PCR:
- Termociclador “Thermo cycler”
- Microcentrífuga
- Micropipetas de 2, 20 y 200 ul
- Microtubos para “PCR”, estériles
- Puntas estériles
- Agua destilada, desionizada y estéril
- ADN molde (ADN en estudio)
Primer
Forward y Reverse- dNTP’s (dATP, dTTP, dCTP, dGTP de [25 μM] c/u)
- 10X buffer para PCR (Solución amortiguadora para “PCR”)
- MgCl2 (25 mM)
- BSA
- Polimerasa Taq
La PCR se realiza en un Termociclador y es una máquina que calienta y enfría la
reacción en periodos cortos de tiempo.
CONCLUSION:
En esta unidad vimos como es que la cadena del ADN se replica y las enzimas que le ayudan a llevar a cabo este desarrollo, en la imagenes fuimos viendo estos pasos y tambien como es que este metodo se puede llevar a cabo por medio de otras tecnicas como son la PCR.
laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/pcr.html
es.wikipedia.org/wiki/Replicación_de_ADN
biolmol.fcien.edu.uy/materiales/Replicacion_del_ADN.pdf
www.ucm.es/info/genetica/grupod/Replicacion/Replicacion.htm
No hay comentarios:
Publicar un comentario